对于PCR实验室的员工而言，在进入、使用与离开实验室时都要遵守相关的操作规范。既然如此，要遵守哪些操作规范呢?下面，就为大家介绍PCR实验室的员工操作规范。

PCR实验室的员工操作规范员工在进入、使用与离开PCR实验室时要遵守以下5条操作规范：

规范1：员工进入PCR实验室前要先进入缓冲间，在工作服外加穿罩衣，戴好口罩、帽子和两层手套，穿好鞋。进入缓冲区后要随手关上外门，需要时打开照明按钮。

规范2：员工在缓冲间内首先要打开缓冲间内的空调，再打开生物安全柜的按钮，把实验所需物品放入生物安全柜中，并且等待10分钟后方能进入实验室。

规范3：员工进入PCR实验室后要先去工作区，打开照明按钮与前玻璃门，把实验所需物品放入实验台内，并且做好清洁物品与污染物品的区分。观察负压表指示数值，若数值不在预定范围内要进行负压调节。观察温湿度计，并填写温湿度计使用记录。

规范4：员工进行实验项目前必须把手臂放入生物安全柜内，待1分钟后才能开始操作。实验结束后要对实验物品进行分类处理，并对工作台面进行消毒。

规范5：工作人员在对实验物品进行分类处理的同时还要打开排风，待风10分钟后放下前玻璃门，打开生物安全柜紫外线灯进行消毒。离开实验室前脱去第二层手套，填写仪器使用记录后才能离开。

PCR技术的问世使病原体检测能够快速、方便地进行。由于PCR技术假阳性率太高，只要有微量病原体存在就可得到阳性结果，这并不能作为诊断依据，只有当一定数量的病原体存在时才有临床意义。因此，对模板准确定量显得特别重要，应用荧光技术PCR就能够快速、准确地得到结果。对于解决学检测的“窗口期”问题，判断疾病是否处于隐性或亚临床状态，以及检测不能判定是现症还是既往时，均可利用PCR进行确定。

示例：新型冠状病毒核酸检测。

方法学：荧光PCR法。

用途：用于体外定性检测新型冠状病毒的疑似病例、疑似聚集例患者、其他需要进行新型冠状病毒诊断或鉴别。

检测基因：新型冠状病毒（2019-nCoV）ORFlab和N基因、E基因。

标本类型：上呼吸道标本：咽拭子、鼻拭子；下呼吸道标本：呼吸道抽取物、肺泡灌洗液样本、肺组织活检标本。

检测流程：

（1）核酸检测前的生物安全防护（工作人员个人三级防护的穿戴）→（2）样本的灭活（56℃灭活30分钟）→（3）样本的核酸提取（手工、核酸提取仪）→（4）PCR体系的配制和模板加样→（5）上机检测及结果分析→（6）检测后的消毒。

其他病原体检测：HIV、甲乙丙肝、HPV、肺支、肺衣、EB病毒、腺病毒、胞病毒、甲乙流、埃博拉病毒、B族链球菌。

适合开展的医院和：儿童医院、妇幼、儿检所、第三方、各种级别的有需求的医院。

（1）渗漏密闭性：将n个PCR管加入半量墨汁，盖好盖子后放入水中，浸泡30min，没有墨汁渗出为合格。

（2）离心密闭性：将n个PCR管加入半量纯水，放入离心机，1000 rpm，30min，管盖未崩开未漏液为合格。

（3）热密闭性：将n个PCR管加入半量纯水，盖好盖子称重后放入PCR仪，设置一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，再进行称重，PCR管未变形，管盖未崩开未漏液，前后重量未变化为合格。

（4）冷密闭性：将n个PCR管加入半量纯水，放入-20℃冰箱，24h，离心管未变形，管盖未崩开未漏液为合格。

（5）污染物质检：将n个PCR管加入半量阴性纯水，盖好盖子涡旋1 min后静置5min，作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。

（6）抑制物质检：将n个PCR管分别加入弱阳性质控物,室温静置5min，然后进行提取;RNA核酸，DNA核酸，室温静置5min，作为模板进行扩增，qPCR扩增未被抑制为合格。

（7）空白荧光通透性：对于qPCR,需要考察PCR管是否有非特异性荧光信号，将n个空PCR管，盖好盖子后放入PCR仪，设置一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，qPCR无扩增为合格。

（8）阳性荧光通透性：对于qPCR,还需要考察PCR管是否会抑制荧光的通透性，将n个含弱阳性样品和扩增试剂的PCR管，与确认无荧光干扰的PCR管，盖好盖子后放入PCR仪一同扩增，设置一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，qPCR扩增未被抑制为合格。